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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
Hep 3B(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環化酶激活肽-27，人，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質量規格：>95%,BR

AGRP Others Human 人 AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環化酶激活肽-27（6-27），人，雞，小鼠，豬，大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質量規格：>95%,BR

人角膜上皮細胞HCEpiC垂體腺苷酸環化酶激活肽-38（16-38），人，雞，小鼠，綿羊，豬，大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質量規格：>95%,BR

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環化酶激活肽相關肽（1-29），大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質量規格：>95%,BR

HMy2.CIR 人 B 母細胞胰多肽，人Pancreatic Polypeptide,human質量規格：>95%,BR
EGFL7 Protein Mouse 重組小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標簽)醋酸艾塞那肽質量規格：度98%以上Exenatide Acetate/Exendin-4

TG-905(人腦膠質母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 心臟微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)非那雄胺質量規格：>99%,BRFinasteride

大鼠海馬神經元RN-h依諾沙星(水溶性）質量規格：依諾沙星含量≥60%Enoxacin

TAOK3 Others Human 人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 (aa 1-411) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氧氟沙星質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養 Ofloxacin

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7氧氟沙星（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Ofloxacin
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞2′-脫氧肌苷-5′-單嶙酸二鈉鹽容量：RT1克

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3DL-3-醇 3-Pyrrolidinol 40499-83-0

CNE1, 人鼻咽癌細胞系1，6-己二醇容量：100克

人纖維肉瘤細胞;HT-1080 大鼠腸平滑肌細胞*培養基 100mLMaltose飴糖100U高，98%

腦靜脈血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)叔丁基tert-Butylmetxyl
膜蛋白提取試劑盒CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)硫酸長春新堿/硫酸醛基長春堿(標準品)Vincristine Sulfate質量規格：HPLC≥98%，標準品

THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠成肌細胞;C2C12帕唑帕尼Pazopanib質量規格：>99%,BR

人小梁網細胞裂解物HTMCL非洛地平/非氯地平Felodipine質量規格：>98%,USP30,BR

AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照) 非洛地平(標準品)Felodipine質量規格：>98%,標準品用于含量測定

小鼠胚胎成纖維細胞;PA3176-硫鳥嘌呤(進分)6-TG/Thioguanine質量規格：>98%,進分,Sigma A4882
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。